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    選擇Agilent液相色譜柱前,了解過它嗎
    發布時間:2022-01-20   點擊次數:189次
      Agilent液相色譜柱以乙烯醇共聚物為基質的色譜柱,即使其載炭量很高也能保持表面的濕潤。多孔結構具有足夠大的平均孔徑,對小分子化合物、多肽和小分子蛋白能夠產生理想的分離效果。
     
      在有機溶劑比例較高的流動相中,該柱具有與硅膠基質色譜柱相同的柱效,但在堿性緩沖溶液為流動相條件下,其分離效率則超過硅膠色譜柱。顯著的特點之一是基質被烷基化的填料的洗脫順序,其保留能力與碳鏈長度成正比。
     
      在選擇Agilent液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質,他們的類型結構、極性、酸堿性、分子量大小等等。
     
      1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。
     
      2.如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。
     
      3.若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質,且硅膠端基封尾)或一些經過修飾的C18柱(如極性嵌入技術或堿去活技術等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
     
      4.如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的Agilent液相色譜柱在高pH值檢測(優點是方法開發簡單,缺點是目前實現這一技術的色譜柱品牌比較少,價格也高)或者選用也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。

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